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人原代肺動脈內(nèi)皮細胞
人原代肺動脈內(nèi)皮細胞
規(guī)格:
貨期:
編號:MZ-4352
品牌:Mingzhoubio

活化細胞
凍存細胞
熒光標(biāo)記細胞

規(guī)格:
T25瓶
凍存管

產(chǎn)品名稱 人原代肺動脈內(nèi)皮細胞
商品貨號 MZ-4352
組織來源 人的正常肺動脈組織
規(guī)格 5×105cells/T25培養(yǎng)瓶
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 上皮細胞樣
培養(yǎng)基 原代內(nèi)皮細胞專用培養(yǎng)基
細胞污染 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌檢測陰性。
細胞描述 肺動脈血管內(nèi)皮細胞是一種多功能細胞,尤其在肺的非呼吸功能方面更具特殊意義。當(dāng)其受損,肺血管通透性升高導(dǎo)致肺水腫,在成年人呼吸窘迫綜合癥發(fā)生機制中具有重要意義。但是處于體內(nèi)多因素共同作用的復(fù)雜環(huán)境中,對肺血管內(nèi)皮細胞的功能和代謝以及病變發(fā)生機制很難作深入研究。原代肺動脈內(nèi)皮細胞的體外培養(yǎng)系統(tǒng)有助于在特定的體外條件下研究肺血管內(nèi)皮細胞的功能。CD31或血管假性血友病因子(vWF)免疫熒光染色為陽性
細胞傳代步驟 如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
細胞復(fù)蘇步驟 將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
細胞凍存步驟 待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶,細胞變圓脫落后,加入2ml完全培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
姓名 手機號(微信同號) QQ
梅經(jīng)理 17280875617 1438578920
胡經(jīng)理 13345964880 2438244627
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